【造模机制】以15%氯化钠配制的60%乙醇可以模拟高盐和乙醇对胃的刺激作用,并在用前加热至55℃可模拟高温食物对胃的刺激作用;脱氧胆酸钠可以模拟十二指肠液(内含胆汁)反流对胃的刺激作用。
【造模方法】Sprague Dawley大鼠,雄性,平均体重170g。脱氧胆酸钠需每次灌胃前新鲜配制,终浓度为20mmol/L。灌胃用60%乙醇是以15%氯化钠加无水乙醇配制而成,灌胃前恒温至55℃。实验周期共13周。实验~35天,大鼠自由饮用脱氧胆酸钠溶液,同时每隔5天以60%乙醇灌胃(10ml/kg)一次,第36~91天,每3天交替饮用脱氧胆酸钠或15%乙醇,同时每隔7天以60%乙醇灌胃一次。造模期间,配合使用饥饱失常法,即:~56天,饱食2天,禁食1天;面对着色深浅不一的组化切片用肉眼观察的结果只能是定性的,不准确的。第57~91天,饱食2天,禁食禁水1天。13周后,模型组大鼠体重比对照组明显下降,胃黏膜厚度明显减小。大体病理可见胃黏膜皱襞变平甚至消失,黏膜血管暴露、黏膜呈颗粒或结节状,组织病理可见黏膜内炎性细胞聚集、腺体明显减少,排列不整,黏膜厚度明显减小。
病理实验外包,病理染色切片常见问题及解决方法:1.切片弯曲且不能形成直带
●原因:①蜡块上下或左右两边不平行。②蜡块与切片刀刀口不平行。③组织块外形不整齐。④切片刀各处的锋利程度不一致。
●解决方法:①将蜡块四边反复修平对称。②调节蜡块夹持器,使其与切片刀平行。③修整组织块时,注意修切整齐。④移动切片刀,更换刀口位置。2.切片上出现裂纹
●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②组织中可能含有较硬之物质,如固定液之结晶石灰质。③包埋时石蜡冻结太慢。
●解决方法:①切片刀某处有缺口,可调换刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整,可先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次,然后按常规磨刀田。②组织中硬性物质太多,则不宜用。③纠正包埋时的缺点。一般待蜡块周围凝结一层,即可放入冷水中。南京英瀚斯,的病理染色实验服务平台。由于不同的蛋白质分子所带的碱性和酸性基团的数目不同,在pH值不同的溶液中,蛋白质分子所带的净电荷多少不同。
病理实验外包,病理染色切片常见问题及解决方法:1.切片粘在切片刀不易取下
●原因:切片时有静电作用,产生静电吸引,在冬季或气候干燥时常出现这种情况。
●解决方法:可用加湿器。以增加空气中的水分,而减少静电作用。
2.切片厚薄不均
●原因:①切片微动部分失灵,齿轮跳格。②蜡块太大,过硬,转动时刀刃受震动。
●解决方法:①修理切片机失灵的部分,调整螺旋。加机油润滑零件,必要时需请技术人员调整切片机。②如蜡块过大,以后取材时注意取材的大小。蜡块组织过硬,可返回水中浸泡,再重新脱水和包埋。
病理实验外包,病理染色肌肉组织染色
1.横纹肌组织染色
Mallory磷钨酸精染色法(PTAH)
蓝色:胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌
黄色或枚红色:胶原纤维、网状纤维基质、骨
微紫色:粗弹性纤维(有时)
紫蓝色或棕黄色:缺血缺氧早期病变的心肌
2.早期心肌病变组织染色
(1)Nagar-Olsen染色法(1974年)
红色:缺氧心肌、红细胞
黄色或黄棕色:正常心肌
蓝色:细胞核
(2)Poley显示缺氧心肌染色法(1964年)
红色:缺氧心肌
紫色:胞核
绿色:其他组织南京英瀚斯,的病理染色实验服务平台。