动物模型的设计原则
适用性和可控性
供医学实验研究用的动物模型,在时,应尽量考虑到今后临床应用和便于控制其疾病的发展,以利于研究的开展。如雌能终止大鼠和小鼠的早期,但不能终止人的。(2)模型特点大鼠在造模4d后开始出现一系列的渐进理变化,肺功能检查模型大鼠第4日时的胸腔气体容积(TGV)值增加65%,而到第8日就不再变化,而造模前后大鼠气道阻力(Raw)值则变化无显著性差异。因此,选用雌大鼠和小鼠终止早期的模型是不适用的,因为在大鼠和小鼠筛选带有雌活性的时,常常会发现这些能终止,似乎可能是有效的避孕药,但一旦用于人则并不成功。所以,如果知道一个化合物具有雌活,用这个化合物在大鼠或小鼠观察终止的作用是没有意义的。又如选用大小鼠作作实验性腹膜炎就不适用,因为它们对革兰氏阴性细菌具有较高的抵抗力,很不容易造成腹膜炎。有的动物对某致病因子特别敏感,极易,也不适用。如狗腹腔注she粪便滤液引起腹膜炎很快( 80%24 小时内),来不及做实验观察,而且粪便剂量及细菌菌株不好控制,因此不能准确重复实验结果。
根据GB19489-2004实验室 生物 安全通用要求,动物实验室的 生物 安全要点:
动物实验室的生物安全防护设施应参照BSL1-4实验室的要求,还应考虑对动物呼吸、排泄、毛发、抓咬、挣扎、逃逸、动物实验(如染毒、医学检查、取样、解剖、检验等)、动物饲养、动物及排泄物的处置等过程产生的潜在生物危害的防护。动物实验室内的温度、湿度、照度、噪声、洁净度等饲养环境应符合国家相关标准的要求。应特别注意对动物源性气溶胶的防护,例如对动物的剖检应在负压剖检台上进行。
应根据动物的种类、身体大小、生活习性、实验目的等选择具适当防护水平的、于动物的、符合国家相关标准的 生物安全柜 、动物饲养设施、动物实验设施、消毒设施和清洗设施等。
实验室建筑应确保实验动物不能逃逸,非实验室动物(如野鼠、昆虫等)不能进入。实验室设计(如空间、进出通道等)应符合所用动物的需要。
动物实验室空气不应循环。动物源气溶胶应经适当的过滤/消毒后排出,不能进入室内循环。
如动物需要饮用无菌水,供水系统应可安全消毒。
动物实验室内的温度、湿度、照度、噪声、洁净度等饲养环境应符合国家相关标准的要求。
方法SD大鼠30只,采用随机数字表法随机分成5组每组6只:正常对照组(Control组),生理盐水组(NS组),尼古J3 mg. kg-1.d-1组(NT3组),尼古丁9mg-kg-1.d-1组(NT9组)和尼古丁18 mg.' kg-1. d1组(NT18组),.分别不zhu射,皮下zhu射生理盐水,尼古丁1 mg/kg,3 mg/kg和6
mg/kg,3次/d,连续7d.末次注she后60 min皮xia注she美加明1 mg/kg.观察大鼠注she尼古J期间和戒断后体重变化,存活情况和古丁戒断评分另外选取Control组NS组和NT9组各6只大鼠测定右下肢足底MWT和TWL.结果与NT3组比较,注she尼古丁后第7天.NT9组和NT18组大鼠体重增加缓慢[(3.8+1.3),(2.0+0.3)g vs (7.2+1.0)g](P <0.05),戒断后di1天和第2天大鼠体重增加迅速(P <0.01).NT9组和NT18组大鼠美加明激发后出现更多的戒断症状(P<0.01,.NT18组大鼠si亡率为17%.与Control组比较.NT9组大鼠在尼古J戒断后MWT与TWL明显降低(P <0.01).结论间断皮xia注she尼古J9 mg-kg-1.d-17 d可以成功制作改良尼古J依赖戒断大鼠模型,尼古J戒断后大鼠疼痛敏感性加高.
前lie腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响
方法:分别采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受体抑zhi剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑zhi剂AH23848 处理的NR8383 细胞作为各实验组,选择未经PGE2以及其特异性受体抑zhi剂处理的NR8383 细胞作为对照组,采用Western blot 和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及mRNA的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激1HUVECs,运用TRANSWELL 小室、Matrigel 胶细胞成管实验等实验方法,观察PGE2调控巨噬细胞对HUVEC 迁移效应和成管能力的影响。方法SD大鼠30只,采用随机数字表法随机分成5组每组6只:正常对照组(Control组),生理盐水组(NS组),尼古J3mg。
结果:随着NR8383 细胞培养液中加入PGE2浓度增gao,其 VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高(P<0.05);0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积,形成小管面积随着PGE2处理浓度的增加而增加(P<0.05);HUVECs的迁移运动也随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强,HUVECs趋化的数量显著升高(P<0.05);研究发现PGE2特异性的EP2/EP4 受体拮抗剂AH6809/AH23848,可以显著抑制PGE2 增强NR8383 细胞内VEGF mRNAs 表达的作用并且也显著抑制PGE2 增强 NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应(P<0.05)。Step3:一段时间以后取血,用血糖yi检测小鼠的禁食12h的血糖浓度。