尽管实践已经证明了吸收技术测量叶绿素含量的有效性,但该方法对样品的要求较高,使其应用范围受到限制。而样品本身的叶绿素荧光则不受样品厚度、均一性等的影响,可以指示叶绿素的含量。根据这个原理,Gitelson等比较了叶片的吸收和反射对叶绿素荧光的影响,发现在735nm和700nm处的比值与叶片的反射相关性最高,并且当样品叶绿素含量在41 mg· m-2到675 mg· m-2时,F735/F700的比值与其叶绿素含量间存在着显著的线性关系(R2≥0.95),与传统的吸收性测量方法相比(测量范围≤300 mg· m-2),提高了叶绿素含量的线性关系范围。
根据Gitelson的研究结果,CCM-300使用具有15nm半峰宽的460nm二极管用于荧光激发,提高了红色荧光波长,避开了大约685nm的发射荧光峰(叶绿素可重新吸收,降低测量精度)。仪器使用在735nm和700nm的叶绿素发射荧光的比率(F735/F700)进行叶绿素含量的测量,读数为F735/F700的比值以及根据Gitelson方程计算的叶绿素含量。
叶绿素含量测量仪
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